色谱柱的性能除了与固定相性能有关外,还与填充技术有关。在正常条件下,填料粒度>;20μm时,干法填充制备柱较为合适;颗粒<20μm时,湿法填充较为理想。填充方法一般有4种:高压匀浆法,多用于分析柱和小规模制备柱的填充;径向加压法,waters;轴向加压法,主要用于装填大直径柱;干法。柱填充的技术性很强,大多数实验室使用已填充好的商品柱。
色谱是一种分离分析手段,分离是,因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的---。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好,分析速度快等。市售的用于hplc的各种微粒填料如多孔硅胶以及以硅胶为基质的键合相、氧化铝、有机聚合物微球(包括离子交换树脂)、多孔碳等,其粒度一般为3,5,7,10μm等,柱效理论值可达5~16万/米。对于一般的分析只需5000塔板数的柱效;对于同系物分析,只要500即可;对于较难分离物质对则可采用---2万的柱子,因此一般10~30cm左右的柱长就能满足复杂混合物分析的需要。
柱效受柱内外因素影响,为使色谱柱达到佳效率,除柱外死体积要小外,还要有合理的柱结构(尽可能减少填充床以外的死体积)及装填技术。即使好的装填技术,在柱中心部位和沿管壁部位的填充情况总是不一样的,tskgel protein c4-300,靠近管壁的部位比较疏松,易产生沟流,流速较快,影响冲洗剂的流形,tskgel protein c4-300,使谱带加宽,tskgel protein c4-300价格,这就是管壁效应。这种管壁区大约是从管壁向内算起30倍粒径的厚度。在一般的液相色谱系统中,柱外效应对柱效的影响远远大于管壁效应。
色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成,压力不高于70 kg/cm2 时,也可采用厚壁玻璃或石英管,管内壁要求有---的光洁度。为提高柱效,减小管壁效应,不锈钢柱内壁多经过抛光。也有人在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度,tskgel protein c4-300多少钱,其效果与抛光相同。还有使用熔融硅或玻璃衬里的,用于细管柱。色谱柱两端的柱接头内装有筛板,是烧结不锈钢或钛合金,孔径0.2~20μm(5~10&μm),取决于填料粒度,目的是防止填料漏出。
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