液相色谱仪峰面积重复性不好怎么回事?
主要原因可能有进样阀漏液、加样针不---或液量不足。针对种情况,处理时应对更换进样阀垫圈;对于第二种情况---加样针插到底,注射样品溶液后须快速、平稳地从load状态转换到inject状态,昭和离子柱,以---进样量的准确。日常工作中,液相色谱仪的保养非常重要,如要注意不要让空气进入输液系统和高压泵中,储液器内的溶液如长时间未用应清洗储液器并更换溶液,每次用完色谱仪后缓冲液要用纯水冲洗干净,防止无机盐析出或沉积;样品的前处理也很重要,任何样品都要尽可能地去除杂质,完全溶解,尽量减少对色谱柱的污染,以延长色谱柱的使用寿命,同时避免注射过浓的样品溶液,以免残留液在进样阀内析出固体引起堵塞;色谱柱作好标记,用于不同分析目的的色谱柱不要混用等。
如何排除液相色谱仪气泡溢出的故障?
流动相内产生都无法清除不断产生的气泡,主要是因为过滤器长期沉浸于铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖,形成菌团,阻塞了过滤器,缓冲液难以流畅地通过过滤器,空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。处理过滤器浸泡于5%溶液中,超声清洗几分钟即可;亦可将过滤器浸泡于5%溶液中12~36小时,轻轻震荡几次,再将过滤器用纯水清洗几次,打开泄压阀,打开purge键清洗脱气,如仍有气泡不断从过滤器冒出,继续将过滤器浸泡于5%溶液中,如没有气泡不断从过滤器中冒出,说明过滤器内部的霉菌菌团已被破坏,流动相可以流畅地通过过滤器。打开泄压阀,打开泵,流速调至1.0~3.0ml/min,纯水冲洗过滤器1小时左右。即可将过滤器清洗干净。关闭泄压阀,纯冲洗半小时即可。
首先要明确做标准曲线的目的,一般是为了含量测定作为标准品来用。液相色谱的浓度和峰面积成正比,样品的含量未知,浓度也就未知,峰面积可读。那么这时需要一个已知含量和已知峰面积的对照品。这个时候做不做标准曲线要看试验方法,昭和离子柱价格,有的方法是外标法,也就是和你样品浓度一样的对照品,平行配制两个,进样分析。有的方法是内标法,就需要样品中添加内标物。还有的面积化,昭和离子柱多少钱,那就什么对照都不要进了。方法要看你的标准,上面应该有计算方法,上面写的是什么,就按照什么来做。不是非标准曲线不可的。
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