阴离子交换柱的填料是正电填料,在低盐条件下可以通过电荷相互作用吸附样品中的阴离子和负电荷物质(如dna).这些带负电的物质由于其带电量不同,分子大小不同,因而与正电填料之间的结合力也就不同.用梯度的氯离子(一般用---梯度,例如从100mm---线性梯度升高到1m---)洗脱挂柱样品时,氯离子会和结合上的物质竞争结合正电填料,伴随着氯离子浓度的不断升高,氯离子的竞争作用越来越强,与填料结合的物质会按照亲和力从弱到强依次洗脱下来,形成独立的洗脱峰,从而将这些物质分开.
阳离子交换柱与之正好相反,柱子填料为负电荷,用钠离子洗脱结合的正电物质.
每次装柱的过程都涉及到填料的脱气处理,及装填柱床时的压缩柱床,离子交换填料,然后脱气时的超声或者抽滤都会对填料施压,压缩柱床也要对填料施压,反复的施压及压力控制不当也会使填料的物理性能发生变化从而影响填料的寿命。
每次装柱的过程都涉及到填料的脱气处理,及装填柱床时的压缩柱床,然后脱气时的超声或者抽滤都会对填料施压,压缩柱床也要对填料施压,反复的施压及压力控制不当也会使填料的物理性能发生变化从而影响填料的寿命。
柱床被---污染或者进气泡时,拆装清洗比cip效果---,更有利于填料寿命衰减的降低。
样品状态
a.样品澄清度:样品越澄清对填料的寿命衰减影响越小。
b.样品粘度:样品的粘度越小,对填料寿命的影响越小。
c.样品酸碱度:过酸过碱都会加速填料寿命的衰减。
d.样品离子强度:离子强度越高填料寿命衰减的越快。
e.样品成分组成:样品成分越复杂,离子交换填料,层析过程越复杂,填料的寿命衰减越快(这也与填料所处的工艺阶段吻合,离子交换填料报价,捕获粗纯阶段填料寿命衰减的更快,离子交换填料多少钱,精纯阶段填料寿命衰减的慢。)
层析工艺
a.柱床高度,流速及反压越大,工艺过程填料受到的外力就会增大,填料的寿命衰减就会增大。
b.层析工艺过程的缓冲液的种类及洗脱的cv数也会影响填料的寿命,缓冲液越温和对填料寿命衰减影响越小,洗脱cv数越小对填料寿命衰减影响越小。
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